近日，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院口腔修復(fù)科研究人員發(fā)表論文，旨在研究骨橋蛋白（osteopontin，OPN）對牙髓干細胞（dentalpulpstemcells，DPSCs）成骨分化的旁分泌作用。研究指出，OPN對DPSCs的旁分泌作用是促進其成骨向分化。該文發(fā)表在2014年第11期《口腔醫(yī)學(xué)研究》雜志上。

　　利用四甲基偶氮唑鹽（MTT）計數(shù)測定不同濃度OPN對細胞增殖的影響；測定DPSCs經(jīng)不同濃度OPN誘導(dǎo)后的堿性磷酸酶（ALP）活性；選取適宜的誘導(dǎo)濃度，在倒置相差顯微鏡下觀察誘導(dǎo)后的DPSCs形態(tài)變化；應(yīng)用茜素紅染色法檢測礦化結(jié)節(jié)的形成；采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-RCR）分別檢測DPSCs骨涎蛋白（BSP）、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runx-2）、骨鈣蛋白（OCN）、Ⅰ型膠原（Col-1）等骨源性基因表達情況。

　　MTT計數(shù)及ALP活性測定實驗表明，隨著OPN濃度增加，ALP活性增強，但細胞增殖率降低。茜素紅染色顯示OPN誘導(dǎo)培養(yǎng)28d后出現(xiàn)礦化結(jié)節(jié)。OPN誘導(dǎo)培養(yǎng)7d后DPSCs骨源性基因表達均成陽性。其中BSP、Runx-2、Col-1及OCN等基因表達水平均明顯高于對照組。

（實習(xí)編輯：徐潤蘭）